Aula Prática Introdução à biologia celular e do desenvolvimento

Aula Prática Introdução à biologia celular e do desenvolvimento

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Roteiro de Aula Prática

Introdução à Biologia Celular e

do Desenvolvimento

Disciplina: Introdução à Biologia Celular e do

Desenvolvimento

ROTEIRO DE AULA PRÁTICA 1

Unidade: 3

Aula (White Label)/Seção (KLS): 3.1

SOFTWARE

☐Software / ☒ Acesso on-line

☐Pago / ☒ Não Pago

Infraestrutura:

O LABORATÓRIO VIRTUAL DEVE SER ACESSADO POR COMPUTADOR. ELE NÃO DEVE

SER ACESSADO POR CELULAR OU TABLET.

O REQUISITO MÍNIMO PARA O SEU COMPUTADOR É UMA MEMÓRIA RAM DE 4 GB.

SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO, POIS ALGUNS PLUGINS SÃO

BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR. A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO, A VELOCIDADE DE

ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA.

1. Caso utilize o Windows 10, dê preferência ao navegador Google Chrome;

2. Caso utilize o Windows 7, dê preferência ao navegador Mozilla Firefox;

3. Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador;

4. Verifique se o seu navegador está atualizado;

5. Realize teste de velocidade da internet.

Descrição do software:

Laboratório Algetec

ATIVIDADE PRÁTICA 1

Atividade proposta:

Extração e purificação de DNA e RNA

Objetivos:

Analisar as funções e as finalidades de cada reagente e/ou material descritos no protocolo de

extração e purificação de DNA ou RNA;

Definir cada etapa descrita no protocolo de extração e purificação de DNA ou RNA.

Procedimentos para a realização da atividade:

Materiais necessários:

Jaleco;

Luvas;

Máscara;

Óculos;

Centrífuga de Eppendorf; Vórtex;

Incubadora;

Tubo de coleta com amostra de sangue;

Tubo Eppendorf;

Tubo spin;

Hipoclorito de sódio;

Ponteira para micropipeta;

Micropipeta;

Nanodrop (espectrofotômetro);

Água Mili-Q;

Notebook;

Álcool 96%;

Kit de extração DNA – Tampão de lise S;

Kit de extração DNA – Tampão de lavagem SI;

Kit de extração DNA – Tampão de lavagem SII;

Kit de extração DNA – Tampão de eluição SI;

Kit de extração DNA – Proteinase K tipo L;

Kit de extração DNA – Tampão de proteinase.

PROCEDIMENTO

1. Segurança do experimento

Coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de EPIs”.

Visualize a pia clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Pia”

localizada dentro do painel de visualização no canto superior esquerdo da tela. Se preferir,

também pode ser utilizado o atalho do teclado “Alt+1”.

Abra a torneira clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pia.

Abra o armário de EPI clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas.

Selecione os EPIs necessários para a realização do ensaio clicando com o botão esquerdo

do mouse sobre eles. Nesse experimento, é obrigatório o uso de jaleco, luvas máscaras e

óculos.

Feche as portas do armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse sobre elas.

2. Etapa da Lise

Nesta etapa, você deverá pipetar 25 μl da Proteinase K no tubo Eppendorf. Em seguida,

pipetar 200 μl da amostra de sangue no mesmo tubo, e por último, pipetar 200 μl do tampão

lise S no tubo. Tampe o Eppendorf e homogeneíze no Vórtex por 20 segundos. Após esse

tempo, incube o Eppendorf por 15 min.

Para isto, siga as etapas ilustradas a seguir:

Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome

“Bancada” ou através do atalho do teclado “Alt+3”.

Ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e, em

seguida, selecione “Reajustar volume”.

Mude o volume da pipeta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box no canto

inferior esquerdo digite o volume e, em seguida, clique em “OK”.

Posicione a pipeta no tubo de Proteinase K clicando com o botão direito do mouse sobre a

mesma e, em seguida, selecione “Colocar em Proteinase K”.

Posicione a pipeta no tubo Eppendorf clicando com o botão direito do mouse sobre a

mesma e, em seguida, selecione “Colocar em Eppendorf”.

Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e, em

seguida, selecione “Trocar ponteira”.

Ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e, em

seguida, selecione “Reajustar volume”.

Mude o volume da pipeta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box no canto

inferior esquerdo, em seguida, clique em “OK”.

Posicione a pipeta no tubo com a amostra de sangue clicando com o botão direito do

mouse sobre a mesma e, em seguida, selecione “Colocar em Amostra de sangue”.

Posicione a pipeta no tubo Eppendorf clicando com o botão direito do mouse sobre a

mesma e, em seguida, selecione “Colocar em Eppendorf”.

Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e, em

seguida, selecione “Trocar ponteira”.

Posicione a pipeta no tampão de lise S clicando com o botão direito do mouse sobre a

mesma e, em seguida, selecione “Colocar em Tampão de lise S”.

Posicione a pipeta no tubo Eppendorf clicando com o botão direito do mouse sobre a

mesma e, em seguida, selecione “Colocar em Eppendorf”.

Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e, em

seguida, selecione “Trocar ponteira”.